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胎牛血清只是營養(yǎng)成分?不!全方位的解讀,它來了!

發(fā)布時間:2023-04-11    瀏覽次數(shù):4092

影響細胞培養(yǎng)結(jié)果的因素有很多,無論是實驗操作的規(guī)范性、細胞的初始狀態(tài)還是培養(yǎng)體系都有可能決定了細胞的生死存亡。

培養(yǎng)基決定了培養(yǎng)體系的優(yōu)劣,是細胞體外生長的營養(yǎng)環(huán)境,對于培養(yǎng)基中重要輔料的牛血清,我們又知道多少呢?

今天我們就一起走進牛血清的大講堂

一、牛血清的功能

在細胞體外培養(yǎng)的早期,培養(yǎng)細胞時采用的大多是天然培養(yǎng)基,即直接取自于動物組織提取液或體液,如血漿、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。目前尚在使用的天然培養(yǎng)基主要有牛血清(Bovine Serum)以及其它動物血清等。

細胞培養(yǎng)中常用的牛血清是一種組分復(fù)雜且尚不完全明確的混合物,含有上千種蛋白質(zhì),提供細胞生長所需要一些生長因子、激素、貼附因子和營養(yǎng)物質(zhì)。通常在基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基中添加 5%~10% 的牛血清用于細胞培養(yǎng)。

除了促細胞貼壁和細胞生長之外,牛血清在一些病毒培養(yǎng)生產(chǎn)過程中被用作保護劑,在體外診斷試劑生產(chǎn)中也有較多應(yīng)用,如封閉液、稀釋液等,其作用與牛血清白蛋白(BSA)類似,起保護作用。

二、國內(nèi)外牛血清產(chǎn)品和法規(guī)

牛血清的來源

牛血清來源于家牛的血液,是凝血或去纖維蛋白的全血離心后的上清成分。

牛血清是肉類工業(yè)的副產(chǎn)品。在屠宰時,可以從成年牛、小牛、非常年幼的小?;蛟谕涝缀蟀l(fā)現(xiàn)牛懷孕時從胎牛身上取血,也可以來自于「供體?!?。

通常以取血時牛的年齡定義牛血清的分類。供血牛的年齡會影響牛血清的特性,例如不同牛齡的牛血清的 IgG(免疫球蛋白 G,Immunoglobulin G)含量有較大差異。

牛血清有關(guān)法規(guī)

由于牛血清在人用疫苗和獸用疫苗等生物制藥生產(chǎn)中非常重要,很多國家都將其納入藥典。在我國的《中華人民共和國藥典》和《中華人民共和國獸藥典》中,以及美國藥典 USP、歐洲藥典 EP 中,都規(guī)定了牛血清的定義和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

美國藥典牛血清分類

按照美國藥典,不同年齡來源的牛血清產(chǎn)品按如下分類。所有牛血清都是在經(jīng)過政府檢查和注冊的屠宰場中收集的。

(1)胎牛血清:胎牛血清,簡稱 FBS(Fetal Bovine Serum),是從健康的產(chǎn)前母牛的胎兒中獲得的,這些母牛經(jīng)有執(zhí)照的獸醫(yī)在其屠宰前和屠宰后檢查后被認(rèn)為適合人類食用。

(2)新生小牛血清:新生小牛血清,簡稱 NBCS(Newborn Calf Serum),又稱 Newborn Bovine Serum,是從 20 天以下的牛身上獲得的。

(3)小牛血清:小牛血清,Calf Serum,是從 20 天到 12 個月的牛身上獲得的。

(4)成牛血清:成牛血清,簡稱 ABS(Adult Bovine Serum),是從 12 個月以上的牛身上獲得的,這些牛被宣布適合人類食用。

(5)供體牛血清:供體牛血清,Donor Bovine Serum,也稱為 Donor Calf Serum,是從受控的經(jīng)政府檢查和注冊的供體牛身上反復(fù)抽血而獲得的。這些牛的年齡在 12~36 個月。

歐洲藥典牛血清分類

歐洲藥典強調(diào)牛血清只能來源于無瘋牛?。˙SE)風(fēng)險或瘋牛病風(fēng)險可控的國家。

1)胎牛血清:取自未出生的牛。

(2)供體小牛血清:取自小于 1 年的供體牛。

(3)供體成牛血清:取自小于 3 年的供體牛。

(4)小牛血清:取自小于 1 年的牛。

(5)成牛血清:對于無瘋牛病風(fēng)險國家,取血牛齡不做限制;對于瘋牛病可控國家,取血牛齡小于 21 個月。

中國藥典對牛血清的規(guī)定

2020 版《中華人民共和國藥典》對新生牛血清定義為:從出生 14 小時內(nèi)未進食的新生牛采血分離血清,經(jīng)除菌過濾后制成。

2020 版《中華人民共和國獸藥典》對牛血清的定義為:

(1)新生牛血清出生 14 小時內(nèi)未進食初乳的新生小牛采血,分離血清,經(jīng)過濾除菌制成。

(2)胎牛血清經(jīng)心臟采集 230~240 日齡的胎牛全血,分離血清,經(jīng)過濾除菌制成。主要用于細胞培養(yǎng)。

由于牛血清是天然成分,因而原料對于牛血清產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要。國際血清行業(yè)協(xié)會 ISIA(International Serum Industry Association)自 2009 年以來一直在發(fā)展可追溯性認(rèn)證計劃,這對確保每個批次牛血清的質(zhì)量、安全性和重復(fù)性起了重要作用。

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