無(wú)菌檢查用硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基配制常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法
發(fā)布時(shí)間：2023-09-22 瀏覽次數(shù)：2605
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（簡(jiǎn)稱FT）可用于需氧菌、兼性需氧、厭氧菌的培養(yǎng)，是藥品生物制品及器械無(wú)菌檢查的常用培養(yǎng)基之一。
FT的特點(diǎn)：該培養(yǎng)基配方特性比較特殊，含少量瓊脂，配制成溶液后呈流體狀，降低液體內(nèi)對(duì)流，防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴(kuò)散，且含有還原性的胱氨酸、硫乙醇酸鈉和氧氣指示劑刃天青，有利于溶液內(nèi)部形成厭氧環(huán)境，且通過(guò)氧氣指示劑顏色變化區(qū)分厭氧層和氧化層。在進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)時(shí)，不需借助厭氧罐、厭氧培養(yǎng)箱等設(shè)備，也不需覆蓋無(wú)菌液體石蠟。
FT配制使用中的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法：
1、滅菌后澄清透明，但放置或培養(yǎng)一段時(shí)間后培養(yǎng)基內(nèi)常出現(xiàn)一些絮狀物，難以與生長(zhǎng)的微生物相區(qū)別？
原因分析：因FT配方含少量瓊脂，如在配制時(shí)沒(méi)有充分加熱將少量瓊脂煮溶，且加熱和分裝時(shí)沒(méi)有充分?jǐn)嚢鑼⑷芙獾沫傊鶆蚍植加谌芤褐校敲捶盅b滅菌冷卻后溶液中瓊脂量相對(duì)稍多的培養(yǎng)基內(nèi)部瓊脂會(huì)凝固成團(tuán)，因此就會(huì)出現(xiàn)白色絮狀懸浮物。此外，也有可能與使用的瓊脂粉本身的澄清度、溶解度和凝固特性有關(guān)，如瓊脂本身粘度高，難分散均勻，或者瓊脂容易聚集凝固，也容易出現(xiàn)絮狀懸浮物。
解決方法：
1）將瓊脂充分煮溶并攪拌使其均勻分布【1】。配制時(shí)將培養(yǎng)基粉末或顆粒溶于純化水中邊加熱邊攪拌均勻，需加熱至完全溶解，建議攪拌煮至沸騰并維持2~3分鐘，再邊攪拌邊分裝，分裝后采用經(jīng)驗(yàn)證的滅菌程序滅菌。
2）選擇使用高透型瓊脂作為原料的FT培養(yǎng)基【2】。如，我司貨號(hào)028034/028034P1的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(高透明度) 產(chǎn)品及其對(duì)應(yīng)即用型成品。
2、培養(yǎng)基滅菌后只存放一天就變青藍(lán)色或淺粉紅色？
原因分析：該培養(yǎng)基含刃天青氧氣指示劑，氧氣充足顯紅色，完全厭氧顯無(wú)色，從有氧過(guò)渡到無(wú)氧或者從無(wú)氧過(guò)渡到有氧時(shí)呈青藍(lán)。因此，滅菌后存放一天就整瓶或整管變色，一方面跟培養(yǎng)基本身的氧化還原能力有關(guān)，另一方面跟分裝容器內(nèi)氧氣量有關(guān)。如培養(yǎng)基開(kāi)封后沒(méi)有密封好，存放期間空氣中的氧氣持續(xù)氧化培養(yǎng)基中的還原性成分，導(dǎo)致該培養(yǎng)基還原性能下降，因此配制滅菌后培養(yǎng)基短時(shí)間內(nèi)容易全被氧化使氧氣指示劑變色。也可能是分裝容器體積比分裝培養(yǎng)基量大很多，容器內(nèi)空氣層大，且非密閉容器，培養(yǎng)基量少還原能力差容易被氧氣氧化所致。
解決方法：
1）干粉或顆粒培養(yǎng)基開(kāi)封后需立即旋緊瓶蓋，減緩培養(yǎng)基被空氣氧化速度，保證其質(zhì)量。
2) 滅菌前分裝至適宜的容器中，其裝量與容器高度的比例應(yīng)不小于2/3,如非壓蓋瓶分裝，滅菌后從滅菌鍋拿出來(lái)需趁熱旋緊瓶蓋或管蓋，以減少瓶?jī)?nèi)氧氣量。
3）選擇即用型成品培養(yǎng)基。這類產(chǎn)品在生產(chǎn)過(guò)程中采用先進(jìn)技術(shù)驅(qū)氧，可以很好解決培養(yǎng)基氧化層的問(wèn)題。如：高透明硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基即用型產(chǎn)品系列。
參考文獻(xiàn)
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