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HEPES溶液與PBS緩沖液的對比
發(fā)布時(shí)間：2022-04-12 瀏覽次數(shù)：4533
生物緩沖液可穩(wěn)定水溶液的 pH 值，因此被廣泛使用于生物實(shí)驗(yàn)中。而過去常用的傳統(tǒng)緩沖液 ，如碳酸鹽緩沖液和磷酸鹽緩沖液，在很多生物實(shí)驗(yàn)中不適用。這些試劑在 pH 7.5 以上不能有效的緩沖， 并會產(chǎn)生一些干擾反應(yīng)。因此Norman Good 博士等人于1966 年提出了一系列可解決傳統(tǒng)緩沖液限 制的兩性離子緩沖液，這些緩沖液的pKa 值等于或接近生理 pH 值，對細(xì)胞無毒，且不會通過細(xì)胞膜吸收。在此為您整理出較常用的PBS(Phosphate buffered saline)與HEPES使用上的優(yōu)缺點(diǎn)。
| HEPES | PBS | |
| 有效的pH范圍 | 6.8-8.2 | 5.8-8.0 |
| 生物毒性 | 不具生物毒性 | 不具生物毒性 |
| 滲透壓 | 使用 0.1 M HEPES 顯著提高了培養(yǎng)基的滲透壓。 | 具備等滲透壓的特性，可防止細(xì)胞破裂。 |
| 細(xì)胞活力 | HEPES 緩沖系統(tǒng)中可以看到更高的最大細(xì)胞密度和活力。 | PBS 稀釋的細(xì)胞培養(yǎng)樣品可能會無意中降低細(xì)胞活力。 |
| 與金屬離子的關(guān)系 | 可以忽略不計(jì)的金屬離子產(chǎn)生絡(luò)合物或沉淀。 | 與部分金屬離子結(jié)合會產(chǎn)生絡(luò)合物或沉淀。 |
| 與酶促反應(yīng)的關(guān)系 | 適合用于酶促反應(yīng) | 可能會抑制酶促反應(yīng) |
| 在冷凍情況下的變化 | HEPES 溶液的冷凍不會導(dǎo)致 pH 變化。 | PBS 溶液的冷凍導(dǎo)致顯著的 pH 變化。 |
| 高壓滅菌 | 不可高壓滅菌 | 可高壓滅菌 |
| 用于電子顯微鏡研究的前綴固定劑 | Hepes 代替 PBS 避免了這種沉淀 | 由于磷酸鹽與二價(jià)陽離子有關(guān)。較高濃度的PBS會導(dǎo)致嚴(yán)重沉淀，從而阻止細(xì)胞有效過濾到過濾器上使用 |
| 用于層析法 | 于層析法中適用 | 于層析法中適用 |
| HClO熒光檢測 | 不適用 | 適用 |
